Journal américain de l'administration de médicaments et de la thérapeutique Libre accès

Abstrait

Séparation de substances d'origine végétale sélectionnées par chromatographie sur couche mince en phase inverse à vitesse de phase mobile contrôlée et gradient de pH par paliers

Adrian Szczyrba, Aneta HaÅ?ka-GrysiÅ?ska*, Tadeusz H. Dzido

De nos jours, la phytothérapie représente l'une des solutions les plus courantes dans le traitement des symptômes mineurs et des maladies majeures (par exemple la maladie d'Alzheimer) [1]. À l'heure de la recherche dynamique de nouvelles substances biologiquement actives d'origine végétale, la chromatographie en couche mince à haute performance, HPTLC, permet une séparation rapide et parallèle de nombreux échantillons. La chromatographie planaire est facilement utilisée pour l'analyse par criblage d'extraits de plantes, de produits médicinaux à base de plantes et de nouvelles substances obtenues par biotransformation. Certaines de ces nouvelles substances possèdent des propriétés acido-basiques (par exemple les alcaloïdes). Dans les solutions aqueuses, elles peuvent se dissocier et présenter des interactions diversifiées des formes ionisées et non ionisées du composé avec la phase mobile et la phase stationnaire. Un outil très important affectant la sélectivité et la forme des photos/taches de ces substances est le pH. Les élus tamponnés étaient couramment utilisés dans la séparation de substances avec des groupes ionogènes à l'aide de la chromatographie sur colonne haute performance, HPLC, et de la chromatographie plane, TLC, [2][3], mais il n'existe aucun exemple de gradient de pH d'éluant dans la chromatographie sur couche mince haute performance en phase inverse, RP-HPTLC. 

Notre groupe de recherche propose la mise en œuvre du dispositif prototype basé sur l'application d'une pipette mobile entraînée par un mécanisme d'imprimante 3D au développement de chromatogrammes. Le dispositif permet de développer les chromatogrammes en couche mince à gradient de pH dans un système en phase inverse avec une vitesse de solvant contrôlée sans flux excessif de l'éluant à la surface de la couche adsorbante [4]. Dans l'étude, l'élution par gradient de pH par étapes a été utilisée pour la séparation de substances sélectionnées présentant des propriétés de base faible. L'utilisation du gradient de pH de la phase mobile a amélioré la sélectivité de séparation et la forme des spots/zones des substances sélectionnées.

Des plaques chromatographiques en verre HPTLC RP-18W (Merck) ont été utilisées comme phase stationnaire. La phase mobile était composée de méthanol et d'un tampon aqueux de pH approprié compris entre 2,5 et 10,5. Les chromatogrammes à gradient de pH obtenus seront présentés. Les avantages et les inconvénients de la solution proposée seront discutés.