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Abstrait

Purification et caractérisation de la peroxydase de la tige de brocoli (Brassica oleracea l. Var. Italica)

Qurratulain Ahmad, Amna Mehmood, Zainab Saeed, Madiha Fayyaz

L'activité enzymatique a augmenté pendant la purification, ce qui pourrait avoir un effet bénéfique sur les plantes. Méthodes et résultats : La purification enzymatique comprenait l'extraction, la précipitation (NH4)2SO4, la dialyse suivie de chromatographies séquentielles avec Sephadex G-75 et Sephadex DEAE A-25. L'enzyme purifiée a été caractérisée par le temps, la stabilité du pH, les ions métalliques, la thermostabilité et la cinétique du substrat a été déterminée en utilisant le gaïacol comme substrat. Le facteur de purification pour la peroxydase de tige de brocoli purifiée était de 72,83 avec un rendement de 1,5 %. Le temps optimal pour l'activité enzymatique était de 6 min. et elle est restée stable entre pH 4 et 8 avec un pH optimal de 6 en utilisant le gaïacol comme substrat. L'enzyme a montré une activité maximale à 30 °C et est restée stable jusqu'à 50 °C. La valeur Km de la peroxydase de brocoli était de 0,35 m.mol/ml et de 33 U/ml pour le substrat de gaïacol en utilisant le graphique de Lineweaver-Burk et de la même manière en utilisant le graphique de Michaelis Menten, les valeurs étaient de 0,34 m.mol/ml. Les métaux tels que Na+, Ca2+, K+, Mg2+ et Zn2+ n'ont montré aucun effet sur l'activité enzymatique.