Journal de pharmacie et de recherche pharmaceutique Libre accès

Abstrait

Optimisation des conditions de fermentation pour la production extracellulaire d'une protéine thérapeutique, l'uricase, par Aspergillus welwitschiae, en utilisant la méthodologie de surface de réponse

Noura El-Ahmady El-Naggar, SA Haroun, Eman M El-Weshy et AA Sherief

Introduction L'uricase est couramment utilisée dans les analyses cliniques pour la détermination de l'urate dans le sang et d'autres liquides biologiques. Les uricases microbiennes en tant que médicament protéique se sont révélées efficaces dans le traitement de l'hyperuricémie et de la goutte, ainsi que dans la prophylaxie et le traitement de l'hyperuricémie par lyse tumorale

Objectifs : Une culture potentielle, la souche 1-4 d'Aspergillus sp., a montré une activité uricase extracellulaire élevée. Cet isolat fongique uricolytique a été identifié comme étant la souche 1-4 d'Aspergillus welwitschiae sur la base de caractéristiques phénotypiques, ainsi que d'une analyse de séquence de la région ITS. Le produit de séquençage a été déposé dans la base de données GenBank sous le numéro d'accès MG323529. Le plan expérimental Plackett-Burman avec 20 essais a été appliqué pour le criblage de quinze variables pour leur signification sur la production d'uricase par Aspergillus welwitschiae.

Résultats : Le temps d'incubation était la variable la plus significative affectant la production d'uricase, suivi par l'extrait de levure et la taille de l'inoculum avec des valeurs de p significatives de 0,0002, 0,0083 et 0,0118 ; respectivement. Ces variables ont été choisies pour les études d'optimisation utilisant un modèle composite central.

Conclusions Il a été constaté que la production maximale d'uricase (59,01 U/mL) par Aspergillus welwitschiae est obtenue dans les conditions de fermentation suivantes g/L : saccharose 30, acide urique 3, peptone 2, extrait de levure 2, NaNO3 2, K2HPO4 1, MgSO4.7H2O 0,2, NaCl 0,2 et FeSO4.7H2O 0,03???, temps d'incubation 7 jours, température 35, pH 6, taille de l'inoculum 4 mL/50 mL de milieu, âge de l'inoculum 72 h et volume de milieu 50 mL/250 mL en fiole conique. Une augmentation globale de 2,5 fois de la production d'uricase par Aspergillus welwitschiae a été obtenue dans le milieu après optimisation statistique par rapport au milieu de base non optimisé (23,58 U/mL) avant l'application de Plackett-Burman. résultat du traitement de la LAL.