Journal de pharmacie et de recherche pharmaceutique Libre accès

Abstrait

Bioprospection et ingénierie rationnelle d'une nouvelle L-asparaginase pour présenter un meilleur produit biopharmaceutique pour le traitement du cancer du sang

Contes A Costa-Silva, IM Costa, GS Agamez-Montalvo, A Pessoa et G Monteiro

Introduction : La L-asparaginase (EC3.5.1.1) produite par des bactéries est utilisée dans le traitement de la leucémie lymphoïde aiguë (LLA). Cependant, d'innombrables effets secondaires ont été enregistrés lors de l'utilisation de la L-ASNase bactérienne pendant le traitement de la LLA. Les autres inconvénients associés au traitement par la L-asparaginase procaryote sont les réactions d'hypersensibilité, la faible stabilité thermique, la dégradation des protéases humaines et la clairance rapide.

Objectifs : Certaines techniques ont été utilisées pour pallier ces inconvénients, comme la bioprospection de sources eucaryotes ou la modification de la L-asparaginase bactérienne commerciale par mutagenèse dirigée. Afin de trouver des sources eucaryotes de L-ASNase, 20 champignons filamenteux ont été utilisés dans cette étude, qui ont été isolés du microbiome de la méduse Olindias sambaquiensis.

Résultats : Six échantillons de champignons isolés des tentacules de méduses (structures brunes des méduses responsables de la production de toxines) ont montré une production de L-asparaginase par un processus de fermentation submergée. L'activité la plus élevée a été montrée par la souche OS02 avec 2,7 U/g. Cette souche a été sélectionnée pour l'optimisation de la production de L-asparaginase par la méthodologie de conception composite centrale de la surface de réponse. Pour une production maximale d'enzyme (11,45 U/g), la meilleure condition était le milieu Czapek Dox modifié supplémenté en L-asparagine et ajusté à pH 7,4 à 32,5 � C et 190 tr/min.

Conclusions : Concernant l'ingénierie protéique de la L-asparaginase bactérienne commerciale, nous avons utilisé la mutagenèse dirigée pour obtenir une résistance à la protéase de la L-asparaginase : une nouvelle variante de la L-asparaginase d'Escherichia coli (EcAII), triple mutante. Les résultats préliminaires ont montré que l'enzyme mutante était exprimée dans E. coli BL21 (DE3) et préservait l'activité L-asparaginase d'origine. Ces formes protéiques de la L-asparaginase peuvent être des produits biopharmaceutiques alternatifs avec le potentiel d'améliorer encore les résultats du traitement de la LAL.